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一、糞鏈球菌微生物檢測板產(chǎn)品介紹
1、原理及適用范圍
糞鏈球菌普遍存在于水環(huán)境中，為條件致病菌，它來(lái)源于人和溫血動(dòng)物的糞便，可以在水中存活很長(cháng)時(shí)間，引起人類(lèi)疾病。是水體受到糞便污染的重要指標菌，更能客觀(guān)的反映水質(zhì)衛生狀況。中華人民共和國城鎮建設標準在對城市供水、飲用水水質(zhì)監測中增加了水中糞鏈球菌的檢測指標。糞鏈球菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產(chǎn)品，含有標準的營(yíng)養培養基，冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑（TTC），菌落在檢測板上呈紅色帶黃暈斑點(diǎn)。本產(chǎn)品適合于生活飲用水、生產(chǎn)加工用水及食品中糞鏈球菌的測定。 
執行標準：中華人民共和國國家標準《飲用天然礦泉水檢驗方法》（GB/T 8538）；中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗行業(yè)標準《出口商品中糞鏈球菌群檢驗》（SN/T 0475）。 
2、操作方法
2.1水樣品檢測
2.1.1 水樣過(guò)濾：將滅菌的過(guò)濾裝置連接到抽濾瓶上，用滅菌鑷子夾取直徑47 mm～50 mm，孔徑為0.45μm的滅菌濾膜，放在濾器底部，旋緊蓋子，將250 mL水樣注入濾器中抽濾。
2.1.2  揭開(kāi)檢測板上層膜，在檢測板紙片上加1 mL無(wú)菌水濕潤后，迅速用無(wú)菌鑷子將過(guò)濾水樣的濾膜移放在檢測板紙片上（濾膜截留細菌面向上），濾膜與紙片之間不要夾留著(zhù)氣泡，貼好上層膜。
2.2食品樣品檢測
2.2.1  取25 g（或25 mL）樣品放入裝有225 mL生理鹽水的均質(zhì)袋中，以8000 r/min均質(zhì)1～2 min，制成1:10樣品均液，根據樣品污染程度及檢驗需要，可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液。
2.2.2 將糞鏈球菌檢測板上層膜不干膠標簽部分揭開(kāi)，用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品稀釋液均勻滴加到紙片上，迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測板，靜置10 s左右，待樣品稀釋液被吸附在濾紙上。每個(gè)稀釋度接種兩個(gè)檢測板作為重復。
2.3 培養：將檢測板疊在一起，倒置于恒溫培養箱內，36℃±1℃，培養15～24 h。
3、糞鏈球菌微生物檢測板結果判讀
在檢測板（濾膜）上生長(cháng)的紅色帶黃暈的斑點(diǎn)即為糞鏈球菌陽(yáng)性，若紙片上的紅色斑點(diǎn)無(wú)黃暈則為糞鏈球菌陰性。

4、計數原則及報告方式
4.1  濾膜過(guò)濾水樣：以濾過(guò)一張無(wú)菌濾膜后產(chǎn)生的菌落數計算，選擇菌落數在20～100CFU的檢測板進(jìn)行計數后即為250 mL水樣品中所含的菌落總數。結果以CFU/250 mL為單位報告。
4.2 食品樣品計數
4.2.1 以生長(cháng)有30～300CFU的檢測板為計數適宜范圍。
4.2.2 若只有一個(gè)稀釋度檢測板上的菌落數在計數合適范圍30～300CFU之間，則計算兩個(gè)檢測板菌落數的平均值，再除以相應的稀釋倍數，作為每克（毫升）中菌落總數結果。
4.2.3 若有兩個(gè)連續稀釋度在適宜計數范圍內時(shí)，按式（1）計算：
∑C
N= ————————     •••••••••••••••••••（1）
（n1+0.1n2）d
式中：
N——樣品中糞鏈球菌菌落數；
∑C——兩個(gè)連續稀釋度檢測板（含適宜范圍菌落數的檢測板）糞鏈球菌菌落之和；
n1——適宜范圍菌落數的*個(gè)稀釋度（低）檢測板個(gè)數
n2——適宜范圍菌落數的第二個(gè)稀釋度（高）檢測板個(gè)數
d——*稀釋度的稀釋倍數
示例：

（245+247+31+30）
N= —————————— =2514
（2+0.1×2）×10-1
結果表述為2.5×103CFU/g(ml)。
4.2.4 若所有稀釋度檢測板上均無(wú)菌落生長(cháng)，則以小于1/d（d—*低稀釋倍數）計算。
4.2.5低數值的估算：如果實(shí)驗樣品原液（水及液體飲料）或初始稀釋?xiě)乙海ㄆ渌麡悠罚┑膬蓚€(gè)檢測板上的菌落數均小于30CFU，計算兩個(gè)檢測板上的菌落數的平均數。計算式（2）：
∑C
NE = ——    •••••••••••••••••••（2）
nd
式中：
NE——每毫升或每克樣品中菌數的估算值；
∑C——兩個(gè)檢測板上菌落數的和；
n——檢測板的數量；
d——樣品初始懸液或實(shí)際接種懸液的稀釋倍數。
4.2.6大數值的估算：若所有稀釋度的檢測板上菌落數均大于300CFU，計數*接近300CFU的檢測板上的菌落并計算出平均數，其他檢測板可記錄為多不可計。結果計算式（3）：
∑C
NE = ——   •••••••••••••••••••（3）
nd
式中：
NE——每毫升或每克樣品中菌數的估算值；
∑C——兩個(gè)檢測板上菌落數之和；
n——檢測板的數量；
d——與樣品懸液相*的稀釋倍數。
5、結果報告
固體樣品以CFU/g為單位報告，液體樣品以CFU/mL為單位報告。
6、附加說(shuō)明
注意使用過(guò)的檢測板上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。